Que sont les normes de diagnostic moléculaire ?

Technologie de diagnostic moléculaire et normes de diagnostic moléculaire

Le diagnostic moléculaire est une technologie qui révèle le mécanisme d'apparition d'une maladie et aide au diagnostic, à l'évaluation du pronostic et à l'orientation du traitement en détectant les caractéristiques moléculaires (telles que la séquence, le niveau d'expression, l'état de méthylation, etc.) des acides nucléiques (ADN, ARN) ou des protéines dans des échantillons biologiques. Son cœur réside dans l'analyse des marqueurs de maladies au niveau moléculaire, en dépassant les limites de la pathologie traditionnelle et des tests biochimiques, et présente une sensibilité élevée (au niveau d'une seule molécule), une spécificité élevée et un potentiel de diagnostic précoce.

Les technologies de base du diagnostic moléculaire comprennent la PCR (PCR quantitative en temps réel, PCR numérique), le séquençage de gènes (NGS, séquençage de Sanger), l'hybridation in situ par fluorescence (FISH), etc., qui sont utilisées dans les maladies infectieuses, le traitement personnalisé des tumeurs (comme l'analyse des mutations EGFR), les maladies génétiques (comme le diagnostic génétique de la thalassémie) et la pharmacogénomique.

Les étalons de diagnostic moléculaire sont des matériaux de référence qui ont été strictement évalués et dont la stabilité a été vérifiée. Ils sont utilisés pour calibrer les instruments, vérifier les performances des méthodes et surveiller la qualité de l’ensemble du processus expérimental afin de garantir l’exactitude, la répétabilité et la comparabilité multiplateforme des résultats des tests. Ses types comprennent des contrôles positifs/négatifs (pour vérifier la spécificité de la détection), des étalons quantitatifs (pour établir des courbes étalons) et des produits de contrôle qualité (pour surveiller la stabilité quotidienne).

Scénarios d'application des normes de diagnostic moléculaire

1. Développement de produits DIV

· Vérification des performances : vérifier la sensibilité et la spécificité du kit de test ;

· Demande d'enregistrement : soumettre les données de réactions croisées des normes.

2. Contrôle qualité des laboratoires cliniques

· Contrôle qualité quotidien : surveiller l'efficacité de l'amplification PCR et l'uniformité de la profondeur du séquençage NGS ;

· Comparaison inter-laboratoires : transférer la valeur à travers des normes pour parvenir à une reconnaissance mutuelle des résultats multi-laboratoires.

3. Développement du diagnostic compagnon

· Appariement des réactifs de diagnostic compagnon : fournir des normes de mutation spécifiques pour garantir l'exactitude de la prédiction de l'efficacité des médicaments ;

· Recherche sur les mécanismes de résistance aux médicaments : créer une bibliothèque standard de mutations génétiques de résistance aux médicaments.

Processus de préparation des normes de diagnostic moléculaire

Matrice d'application client des normes de diagnostic moléculaire dans la chaîne industrielle du DIV

Ⅰ. En amont de la chaîne industrielle du DIV : « règle » de la fabrication d'instruments et de matières premières

1. Groupe de clients : fabricants d'équipements d'instrumentation (plateforme NGS/qPCR/ddPCR)

Scénario de demande :

· Vérification des performances des nouveaux équipements (test de sensibilité/spécificité/répétabilité) ;

· Étalonnage de cohérence des résultats de tests multiplateformes.

Sélection standard :

· Normes compatibles multiplateformes (telles que les normes quantitatives universelles d'ADN) ;

· Produits de simulation d'échantillons extrêmes (teneur élevée en GC, ADN fragmenté).

2. Groupe de clients : fournisseur de matières premières de base (enzyme, amorce, sonde)

Scénario de demande :

· Contrôle de qualité des lots de matières premières (tel que la vérification de l'activité de l'enzyme Taq) ;

· Analyse comparative des performances des produits compétitifs (test des différences de sensibilité des matières premières à travers des produits standards).

Sélection standard :

· Échantillons simulés contenant des inhibiteurs (vérification de la capacité anti-interférence) ;

· Étalons cibles à faible concentration (détection de matières premières extrêmement sensibles).

Ⅱ. Chaîne industrielle intermédiaire du DIV : « navigateur » pour le développement de kits

1. Groupe de clients : entreprises de R&D sur les kits IVD

Scénarios de demande :

· Étape de R&D : sélection et vérification des cibles (telles que le test de couverture de nouveaux sites de mutation) ;

· Optimisation des performances : vérification de la sensibilité/spécificité (détermination LoD/LoQ) ;

· Demande d'enregistrement : fournir des données traçables de tiers, telles que des ensembles de produits standard accompagnés de certificats d'analyse (COA) ;

· Inspection de la qualité de la production : tests de libération des lots, tels que les normes génétiques de référence internes.

Sélection de produits standards :

· Normes de vérification du panel PCR/NGS multiplex ;

· Normes matricielles complexes (telles que les simulations d'ADNct dans le plasma).

2. Développeur du panneau de référence (Panel)

Scénarios de demande :

· Vérification des réactions croisées des kits de détection conjointe multi-cibles ;

· Développement de substituts d'échantillons cliniques (tels que des échantillons de simulation FFPE).

Sélection de produits standards :

· Normes de vérification du panel PCR/NGS multiplex ;

· Normes matricielles complexes (telles que les simulations d'ADNct dans le plasma).

Ⅲ. En aval de la chaîne industrielle du DIV : « Gardien » de l’application clinique et du contrôle qualité

1. Groupe de clients : entreprises pharmaceutiques (développement de diagnostics compagnons)

Scénarios de demande :

· Vérification de l'appariement médicament-biomarqueur ;

· Surveillance dynamique des mutations résistantes aux médicaments.

Exigences fondamentales :

· Produits standards développés simultanément avec les kits CDx ;

· Équivalents d'échantillons d'essais cliniques de diagnostic compagnon.

2. Agences de tests tierces (LDT/instituts de tests médicaux)

Scénarios de demande :

· Contrôle qualité quotidien : suivi de précision intra-lot/inter-lot ;

· Évaluation de la qualité interlaboratoires (EQA) : comparaison de la cohérence des résultats entre laboratoires ;

· Vérification de la limite de détection : confirmation LoD.

3. Laboratoire hospitalier/Département de pathologie

Scénarios de demande :

· Vérification de nouveaux projets de tests (tels que la vérification à l'hôpital du panel NGS tumoral) ;

· Traçabilité et interprétation des résultats des rapports.

Solutions pour les points douloureux :

· Produits standards préemballés prêts à l'emploi (réduction de la complexité opérationnelle) ;

· Guide d'interprétation rapide (tel que le seuil d'interprétation de la valeur Ct/fréquence de mutation).

Normes de diagnostic moléculaire CB-Gene Biotechnology

Les normes de diagnostic moléculaire des tumeurs de CB-Gene Biotechnology couvrent une variété de types de mutation, notamment les normes de mutation, les normes de fusion, les normes CNV (variation du nombre de copies), les normes MSI (instabilité des microsatellites), les normes TMB (charge de mutation tumorale), les normes HRR (réparation par recombinaison homologue), etc. tissu). Qu'il s'agisse d'une norme à point unique ou d'une norme de panel, Kebai Biotechnology contrôle strictement la qualité et améliore le service standard de diagnostic moléculaire de la plus haute qualité du client.