La pureté, la concentration et la structure des étalons sont vérifiées à l'aide de diverses techniques (telles que la HPLC, la spectrométrie de masse et l'analyse des acides aminés). Des tests de stabilité (expériences de dégradation accélérée), une validation fonctionnelle (telle que l'immunoréactivité et l'activité enzymatique) et une évaluation de l'effet matriciel sont effectués si nécessaire.
Les standards sont mélangés aux concentrations cibles et placés dans une matrice appropriée (telle qu'un tampon ou un sérum artificiel). Les conditions de stockage et les additifs (tels que les inhibiteurs de protéase) sont optimisés pour éviter les interactions entre les composants.