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Génération de lignées cellulaires stables

Lenti-intégrés

Lentivirus est un genre de rétrovirus de la famille des Retroviridae. Les lentivirus codent pour la transcriptase inverse et l'intégrase, permettant à l'ARN viral d'être transcrit de manière inverse en ADN et de s'intégrer de manière stable dans le génome de l'hôte. Après l’intégration, le matériel génétique viral est répliqué au cours de la division de la cellule hôte, permettant une expression génique stable et à long terme.
 
 

Flp-FRT intégré

La recombinase Flp (flippase) est une enzyme de recombinaison spécifique à un site dérivée de la levure. Le gène FLP mesure environ 1 272 pb et code pour un polypeptide de 423 acides aminés avec un poids moléculaire d'environ 48 kDa. Flp fonctionne comme un monomère.
 
FRT (Flp Recombination Target) est la séquence d'ADN spécifique reconnue par la recombinase Flp. Le site FRT mesure 48 pb de longueur et se compose de deux répétitions inversées de 13 pb flanquant un espaceur asymétrique de 8 pb, ainsi qu'une répétition supplémentaire de 13 pb. Les répétitions inversées servent de sites de liaison Flp, tandis que la région espaceur définit le site de recombinaison et confère une directionnalité à l'événement de recombinaison.
 

Plasmide intégré de manière aléatoire

La transfection plasmidique est une technique permettant d'introduire de l'ADN plasmidique dans les cellules, permettant aux scientifiques d'étudier la fonction, l'expression et les effets cellulaires des gènes. Il s’agit d’introduire de l’ADN étranger dans les cellules à l’aide de méthodes non virales, telles que l’électroporation ou des réactifs chimiques.

CB-Gene fournit des services de développement de lignées cellulaires stables basés sur un « système d'intégration aléatoire de plasmides ». À ce jour, nous avons généré avec succès plus de 500 modèles de lignées cellulaires stables, démontrant une vaste expérience dans l’intégration du génome basé sur les plasmides.
 

Électroporation intégrée

L'électroporation, également connue sous le nom d'électroperméabilisation, est une méthode d'administration non virale très efficace pour introduire des acides nucléiques (ADN ou ARN), des protéines, des médicaments et d'autres molécules dans les cellules. Des impulsions électriques courtes et contrôlées perméabilisent de manière transitoire la membrane cellulaire, permettant l'absorption de ces molécules.

Une fois que l’ADN plasmidique pénètre dans la cellule, il peut agir sur la cellule. Le matériel génétique peut rester isolé (sous forme de plasmide, non intégré) ou, selon les étapes expérimentales ultérieures, s'intégrer dans le génome de l'hôte.

Intégré au transposon

Les éléments transposables (ET), également appelés gènes sauteurs, sont des séquences d'ADN capables de se déplacer d'un emplacement génomique à un autre. Découverts pour la première fois par Barbara McClintock, les ET sont désormais reconnus comme des composants omniprésents des génomes des procaryotes et des eucaryotes. Dans de nombreux organismes, ils constituent une proportion substantielle du génome, par exemple environ 50 % du génome humain et jusqu'à 90 % de celui du maïs.
 
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Norme d'intégration des lentivirus
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