multi-locus de correspondance HLANormes

Qu’est-ce que la correspondance HLA et le génotypage multilocus ?

En termes simples, la correspondance HLA et le génotypage multilocus sont une technologie de test génétique très précise utilisée pour déterminer le type spécifique d'une personne à plusieurs loci clés de son système d'antigène leucocytaire humain (HLA).

Nous pouvons décomposer ce concept :

1.HLA (antigène leucocytaire humain) : 

*Il ne s'agit pas d'un seul gène, mais de tout un ensemble de gènes très importants dans le corps humain, situés sur le chromosome 6.

*Cet ensemble de gènes code pour des protéines appelées « antigènes », qui agissent comme des « cartes d'identification » et sont situées à la surface de presque toutes les cellules (en particulier les globules blancs).

*Le système immunitaire utilise ces « cartes d'identification » pour faire la distinction entre le « soi » et le « non-soi ». S'il s'agit du « soi », il reste inchangé ; s'il s'agit d'un « non-soi » (comme des virus, des bactéries ou des organes transplantés), le système immunitaire lance une attaque.

2.Multilocus : 

*Le système HLA contient des centaines de gènes, mais plusieurs loci sont particulièrement critiques pour la transplantation. « Multilocus » fait référence au test simultané de ces locus les plus importants.

*Les loci principaux comprennent généralement :

HLA-A, HLA-B, HLA-C (antigènes de classe I, présents sur presque toutes les cellules nucléées)

HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP (antigènes de classe II, principalement présents sur les cellules immunitaires telles que les cellules B et les macrophages)

*Ainsi, le « typage multi-locus » caractérise de manière exhaustive ces trois loci de classe I et trois loci de classe II (un total de six).

3.Génotypage : 

*Les techniques antérieures (telles que les méthodes sérologiques) ne pouvaient détecter qu’un schéma approximatif des niveaux de protéines HLA.

*Le génotypage examine directement l'ADN lui-même, à l'aide de techniques de biologie moléculaire (telles que PCR-SSP, PCR-SSO et séquençage de nouvelle génération (NGS)) pour déterminer la séquence de bases précise du gène HLA.

*Cette technique est extrêmement précise et peut détecter des différences subtiles que les méthodes sérologiques ne peuvent pas distinguer, permettant ainsi des donneurs et des receveurs plus compatibles.

Résumé : Le génotypage multi-locus correspondant à HLA utilise une technologie de séquençage d'ADN de haute précision pour effectuer une analyse détaillée de plusieurs sites de gènes HLA qui sont les plus critiques en matière de transplantation afin de déterminer le génotype le plus précis.

Le rôle du génotypage multilocus correspondant à HLA

Son objectif principal est de maximiser la survie du greffon et de minimiser le risque de complications graves après la transplantation.

Spécifiquement:

1. Évaluation de la compatibilité immunitaire entre donneur et receveur : en comparant les résultats de typage HLA du donneur (donneur) et du receveur (patient), les médecins peuvent déterminer dans quelle mesure leurs « cartes d'identité » sont similaires. Plus la correspondance est élevée, plus le risque que le système immunitaire du receveur reconnaisse l'organe transplanté comme « étranger » et l'attaque (c'est-à-dire le rejette) est faible.

2. Sélection du meilleur donneur : lorsque plusieurs donneurs potentiels sont disponibles (tels que des frères et sœurs, des volontaires provenant de banques de moelle osseuse ou de banques de sang de cordon), il s'agit de la référence en matière de sélection du donneur le plus compatible. Le degré de compatibilité est l’un des facteurs clés déterminant le succès d’une greffe.

3. Prédire et atténuer les risques :

*Réduction de la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) : ceci est particulièrement important dans la greffe de moelle osseuse/cellules souches hématopoïétiques. Si les cellules souches hématopoïétiques transplantées (du donneur) reconnaissent le corps du receveur comme étant un « non-soi », elles attaqueront les tissus et les organes du receveur, provoquant une GvHD, une complication potentiellement mortelle. Une bonne correspondance HLA peut réduire considérablement l’incidence et la gravité de la GvHD.

*Réduire le rejet : dans les transplantations d'organes solides (telles que les transplantations de rein, de foie, de cœur et de poumons), une bonne correspondance HLA peut réduire le risque que le corps du receveur rejette l'organe transplanté.

Quelles maladies sont associées à cette procédure ?

Cette technologie est principalement pertinente pour les maladies qui nécessitent une transplantation pour être traitées, plutôt que pour les maladies qui provoquent directement des anomalies HLA.

1. Maladies nécessitant une greffe de moelle osseuse/cellules souches hématopoïétiques :

*Leucémie (telle que la leucémie myéloïde aiguë (LMA) et la leucémie lymphoblastique aiguë (LAL))

*Lymphome

*Anémie aplasique sévère

*Thalassémie

*Drépanocytose

*Déficit immunitaire combiné sévère

*Certains troubles métaboliques héréditaires

Pour la transplantation de moelle osseuse, les exigences de compatibilité HLA sont les plus élevées et les plus strictes, exigeant généralement une correspondance complète (6/6, 8/8, 10/10) ou la correspondance la plus élevée possible.

2. Maladies nécessitant une transplantation d’organe solide :

*Insuffisance rénale terminale (nécessitant une greffe de rein)

*Maladie hépatique terminale (telle que la cirrhose et le cancer du foie, nécessitant une greffe du foie)

*Insuffisance cardiaque terminale (nécessitant une transplantation cardiaque)

*Maladie pulmonaire terminale (nécessitant une transplantation pulmonaire)

* Diabète de type 1 (nécessitant parfois une transplantation de cellules d'îlots pancréatiques)

Pour la transplantation d’organes solides, l’importance de la correspondance HLA varie en fonction de l’organe. Parmi eux, les greffes de rein et de pancréas dépendent le plus de la compatibilité HLA, les reins bien appariés ayant des durées de survie significativement plus longues. Pour les greffes de foie, de cœur et de poumons, la compatibilité HLA a un poids relativement moindre en raison de facteurs tels que la plus grande sensibilité des organes aux lésions ischémiques et les délais d'attente plus longs, mais elle reste une considération importante.

Scénarios d'application

1. Appariement donneur-receveur avant la greffe : il s’agit du scénario d’application le plus fondamental. Ce test est obligatoire à la fois pour les transplantations de famille à famille et pour trouver des donneurs non apparentés via la China Bone Marrow Bank ou le système d'attribution d'organes.

2. Développement d'une base de données de donneurs de cellules souches hématopoïétiques (banque de moelle osseuse) : lorsque les volontaires s'inscrivent à la banque de moelle osseuse, ils subissent un génotypage multilocus HLA et leurs données sont saisies dans la base de données. Lorsqu'un patient a besoin d'un donneur, la base de données peut être rapidement recherchée pour trouver un donneur compatible.

3. Développement d'une banque de sang de cordon ombilical : lors de la conservation du sang de cordon, le typage HLA est obligatoire pour les échantillons de sang de cordon afin d'en faciliter l'accès et l'utilisation futurs.

4. Diagnostic auxiliaire de certaines maladies :

Bien qu’elles ne soient pas directement utilisées pour le diagnostic, certaines maladies auto-immunes sont fortement associées à des types HLA spécifiques. Par exemple:

* La spondylarthrite ankylosante est fortement associée au HLA-B27.

* La polyarthrite rhumatoïde est associée à HLA-DR4.

* Le diabète de type 1, la maladie cœliaque et d'autres affections sont également associés à des types HLA spécifiques. Dans de tels cas, le typage HLA peut être utilisé comme outil de diagnostic auxiliaire et de prédiction du risque de maladie.

5. Tests de paternité et médecine légale : En raison du polymorphisme extrêmement élevé du système HLA (qui varie considérablement d'une personne à l'autre), il était autrefois un outil clé pour les tests de paternité. Bien qu’elle soit aujourd’hui largement remplacée par la technologie STR, elle conserve néanmoins une certaine valeur.

6. Pharmacogénomique : Certains génotypes HLA sont associés à des réactions indésirables graves à des médicaments spécifiques. Par exemple, les personnes portant l'allèle HLA-B*15:02 courent un risque accru de réactions allergiques cutanées graves, telles que le syndrome de Stevens-Johnson (SJS), lorsqu'elles prennent l'antiépileptique carbamazépine. Par conséquent, un dépistage génétique HLA est effectué sur des populations spécifiques avant d’utiliser ces médicaments.