de múltiples locus de coincidencia de HLAEstándares

¿Qué es la coincidencia HLA y el genotipado multilocus?

En pocas palabras, la coincidencia de HLA y el genotipado multilocus es una tecnología de prueba genética de alta precisión que se utiliza para determinar el tipo específico de una persona en múltiples loci clave dentro de su sistema de antígeno leucocitario humano (HLA).

Podemos desglosar este concepto:

1.HLA (antígeno leucocitario humano): 

*No se trata de un único gen, sino de todo un conjunto de genes muy importantes en el cuerpo humano, situados en el cromosoma 6.

*Este conjunto de genes codifica proteínas llamadas 'antígenos', que actúan como 'tarjetas de identificación' y se encuentran en la superficie de casi todas las células (especialmente los glóbulos blancos).

*El sistema inmunológico utiliza estas 'tarjetas de identificación' para distinguir entre lo 'propio' y lo 'no propio'. Si es lo 'propio', no se ve afectado; si es 'ajeno' (como virus, bacterias u órganos trasplantados), el sistema inmunológico lanza un ataque.

2.Multilocus: 

*El sistema HLA contiene cientos de genes, pero varios loci son particularmente críticos para el trasplante. 'Multilocus' se refiere a la prueba simultánea de estos loci más importantes.

*Los loci centrales normalmente incluyen:

HLA-A, HLA-B, HLA-C (antígenos de clase I, presentes en casi todas las células nucleadas)

HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP (antígenos de clase II, presentes principalmente en células inmunitarias como las células B y los macrófagos)

*Por lo tanto, la 'tipificación de locus múltiples' caracteriza de manera integral estos tres loci de clase I y tres loci de clase II (un total de seis).

3.Genotipado: 

*Las técnicas anteriores (como los métodos serológicos) sólo podían detectar un patrón aproximado de los niveles de proteína HLA.

*El genotipado examina directamente el ADN mismo, utilizando técnicas de biología molecular (como PCR-SSP, PCR-SSO y secuenciación de próxima generación (NGS)) para determinar la secuencia de bases precisa del gen HLA.

*Esta técnica es extremadamente precisa y puede detectar diferencias sutiles que los métodos serológicos no pueden distinguir, permitiendo así donantes y receptores más compatibles.

Resumen: El genotipado de múltiples locus de coincidencia de HLA utiliza tecnología de secuenciación de ADN de alta precisión para realizar un análisis detallado de múltiples sitios de genes HLA que son más críticos en el trasplante para determinar el genotipo más preciso.

El papel del genotipado multilocus de coincidencia de HLA

Su objetivo principal es maximizar la supervivencia del injerto y minimizar el riesgo de complicaciones graves postrasplante.

Específicamente:

1.Evaluación de la compatibilidad inmunitaria entre el donante y el receptor: al comparar los resultados de la tipificación HLA del donante (donante) y del receptor (paciente), los médicos pueden determinar qué tan similares son sus 'tarjetas de identidad'. Cuanto mayor sea la coincidencia, menor será el riesgo de que el sistema inmunológico del receptor reconozca el órgano trasplantado como 'extraño' y lo ataque (es decir, lo rechace).

2. Selección del mejor donante: cuando hay varios donantes potenciales disponibles (como hermanos, voluntarios de bancos de médula ósea o bancos de sangre de cordón umbilical), este es el estándar de oro para seleccionar el donante más compatible. El grado de compatibilidad es uno de los factores clave que determinan el éxito de un trasplante.

3.Predecir y mitigar riesgos:

*Reducción de la enfermedad de injerto contra huésped (GvHD): esto es particularmente importante en el trasplante de médula ósea/células madre hematopoyéticas. Si las células madre hematopoyéticas trasplantadas (del donante) reconocen el cuerpo del receptor como 'no propio', atacarán los tejidos y órganos del receptor, provocando GvHD, una complicación potencialmente fatal. Una buena compatibilidad de HLA puede reducir significativamente la incidencia y la gravedad de la GvHD.

*Reducción del rechazo: En los trasplantes de órganos sólidos (como los de riñón, hígado, corazón y pulmón), una buena compatibilidad HLA puede reducir el riesgo de que el cuerpo del receptor rechace el órgano trasplantado.

¿Qué enfermedades están asociadas con este procedimiento?

Esta tecnología es principalmente relevante para enfermedades que requieren un trasplante para su tratamiento, más que para enfermedades que causan directamente anomalías del HLA.

1. Enfermedades que requieren trasplante de médula ósea/células madre hematopoyéticas:

*Leucemia (como la leucemia mieloide aguda (AML) y la leucemia linfoblástica aguda (ALL))

*Linfoma

*Anemia aplásica severa

*talasemia

*Anemia drepanocítica

*Inmunodeficiencia combinada grave

*Ciertos trastornos metabólicos hereditarios

Para el trasplante de médula ósea, los requisitos de compatibilidad HLA son los más altos y estrictos y, por lo general, requieren una compatibilidad completa (6/6, 8/8, 10/10) o la mayor compatibilidad posible.

2. Enfermedades que requieren trasplante de órganos sólidos:

*Enfermedad renal terminal (que requiere un trasplante de riñón)

*Enfermedad hepática terminal (como cirrosis y cáncer de hígado, que requieren un trasplante de hígado)

*Insuficiencia cardíaca terminal (que requiere un trasplante de corazón)

*Enfermedad pulmonar en etapa terminal (que requiere un trasplante de pulmón)

*Diabetes tipo 1 (a veces requiere un trasplante de células de los islotes pancreáticos)

Para el trasplante de órganos sólidos, la importancia de la compatibilidad HLA varía según el órgano. Entre ellos, los trasplantes de riñón y páncreas son los que más dependen de la compatibilidad HLA, y los riñones bien compatibles tienen tiempos de supervivencia significativamente más largos. Para los trasplantes de hígado, corazón y pulmón, la compatibilidad HLA tiene un peso relativamente menor debido a factores como la mayor sensibilidad de los órganos al daño isquémico y los mayores tiempos de espera, pero sigue siendo una consideración importante.

Escenarios de aplicación

1. Emparejamiento entre donante y receptor antes del trasplante: este es el escenario de aplicación más básico. Esta prueba es obligatoria tanto para trasplantes de familia a familia como para encontrar donantes no emparentados a través del China Bone Marrow Bank o el Organ Allocation System.

2. Desarrollo de una base de datos de donantes de células madre hematopoyéticas (Banco de Médula Ósea): Cuando los voluntarios se inscriben en el Banco de Médula Ósea, se les realiza un genotipado multilocus HLA y sus datos se ingresan en la base de datos. Cuando un paciente necesita un donante, se puede buscar rápidamente en la base de datos un donante compatible.

3. Desarrollo de un banco de sangre de cordón umbilical: al almacenar sangre de cordón umbilical, la tipificación HLA es obligatoria para las muestras de sangre de cordón umbilical para facilitar el acceso y uso futuro.

4. Diagnóstico auxiliar de determinadas enfermedades:

Aunque no se utilizan directamente para el diagnóstico, algunas enfermedades autoinmunes están fuertemente asociadas con tipos específicos de HLA. Por ejemplo:

* La espondilitis anquilosante está altamente asociada con HLA-B27.

* La artritis reumatoide está asociada con HLA-DR4.

* La diabetes tipo 1, la enfermedad celíaca y otras afecciones también se asocian con tipos específicos de HLA. En tales casos, la tipificación HLA se puede utilizar como herramienta para el diagnóstico auxiliar y la predicción del riesgo de enfermedad.

5. Pruebas de paternidad y análisis forense: debido al polimorfismo extremadamente alto del sistema HLA (que varía significativamente de persona a persona), alguna vez fue una herramienta clave para las pruebas de paternidad. Aunque ahora ha sido reemplazada en gran medida por la tecnología STR, todavía tiene cierto valor.

6. Farmacogenómica: Ciertos genotipos HLA se asocian con reacciones adversas graves a fármacos específicos. Por ejemplo, las personas con el alelo HLA-B*15:02 tienen un mayor riesgo de sufrir reacciones alérgicas cutáneas graves, como el síndrome de Stevens-Johnson (SJS), cuando toman el fármaco antiepiléptico carbamazepina. Por lo tanto, el cribado genético HLA se realiza en poblaciones específicas antes de utilizar estos fármacos.