Usted está aquí: Hogar » Servicios » ISA (análisis del sitio de integración) » Gen exógeno-ISA

Servicio de análisis de sitios de integración de genes exógenos

Con el rápido avance de la tecnología de ingeniería genética, la introducción e integración de genes exógenos se ha convertido en una herramienta clave en la investigación biomédica, la terapia génica y el mejoramiento agrícola. Sin embargo, el sitio de integración de un gen exógeno dentro del genoma del huésped tiene un impacto crucial en la estabilidad de su expresión, su rendimiento funcional y su seguridad. Por lo tanto, los servicios de análisis del sitio de integración de genes exógenos han surgido como una herramienta crucial para garantizar la seguridad y eficacia de la técnica de manipulación genética.

Definición

El análisis del sitio de integración de genes exógenos utiliza técnicas de biología molecular para identificar con precisión la ubicación de inserción, el número de copias y el estado de integración de un gen exógeno dentro del genoma de la célula huésped. Esta prueba no solo examina si el gen exógeno se ha integrado con éxito, sino que también se centra en analizar las características del sitio de integración, como si está ubicado en la región codificante del gen, la región reguladora o la secuencia repetitiva, evaluando así su impacto potencial en la función del gen huésped.

Principio de detección

Los principios básicos del análisis del sitio de integración de genes exógenos se basan en la hibridación de ácidos nucleicos, la amplificación por PCR y tecnologías de secuenciación de alto rendimiento. Actualmente, los métodos convencionales incluyen:

1. Los métodos basados en PCR, como la PCR inversa y la PCR mediada por ligadura, utilizan cebadores específicos para amplificar la región de unión entre el gen exógeno y el genoma del huésped, identificando así el sitio de integración.

2. Las tecnologías de secuenciación de alto rendimiento, como la secuenciación del genoma completo (WGS), la secuenciación dirigida y la captura de la conformación de la cromatina (Hi-C), permiten una identificación de alto rendimiento y alta precisión de sitios de integración de genes exógenos en todo el genoma, al mismo tiempo que analizan simultáneamente el número de copias y la variación estructural.

3. Hibridación in situ por fluorescencia (FISH): las sondas marcadas con fluorescencia se hibridan con los cromosomas del huésped para visualizar directamente la ubicación física del gen exógeno.

La aplicación combinada de estas tecnologías permite un análisis completo y preciso del estado de integración del gen exógeno.

Flujo de trabajo

Un servicio completo de análisis del sitio de integración de genes exógenos normalmente incluye los siguientes pasos:

1.Preparación de la muestra

Extraiga ADN genómico de las células que se van a analizar, garantizando que la calidad del ADN cumpla con los requisitos de la prueba.

2.Construcción de biblioteca

Construya una biblioteca de secuenciación o PCR, según el método de prueba. Por ejemplo, en WGS, es necesario fragmentar el ADN genómico y agregar adaptadores de secuenciación.

3. Secuenciación o amplificación

La secuenciación del genoma completo se realiza mediante un instrumento de alto rendimiento o la región objetivo se amplifica mediante PCR.

4.Análisis de datos

Las herramientas bioinformáticas se utilizan para alinear datos de secuenciación, identificar las secuencias límite entre el gen exógeno y el genoma del huésped, determinar el sitio de integración y evaluar el número de copias, la orientación de inserción y la función del gen cercano.

5.Verificación de resultados

Los sitios de integración clave se verifican mediante técnicas como la secuenciación de Sanger, qPCR o FISH para garantizar la confiabilidad de los resultados.

6.Generación de informes

Se proporciona un informe de prueba detallado, que incluye coordenadas del sitio de integración, anotaciones genómicas, análisis de riesgos potenciales y gráficos visuales.

Ventajas del servicio

Alta precisión y alto rendimiento

Aprovechando la tecnología de secuenciación de próxima generación, se pueden analizar múltiples muestras simultáneamente, identificando con precisión los sitios de integración en todo el genoma, incluso detectando eventos de integración de baja frecuencia.

Integralidad

Además de proporcionar información sobre el sitio de integración, también analiza el número de copias, la estructura de inserción y los posibles efectos sobre los genes del huésped (por ejemplo, si altera los genes supresores de tumores o activa los oncogenes).

Eficiencia y Automatización

Aprovechando los procesos bioinformáticos probados, procesa rápidamente grandes cantidades de datos, acorta los ciclos de análisis y mejora la eficiencia de la investigación.

Evaluación de seguridad

La anotación del sitio de integración permite predecir los riesgos potenciales asociados con la inserción de genes exógenos, lo que proporciona una base clave para las evaluaciones de seguridad de la manipulación genética.

Servicios personalizados

Se pueden proporcionar soluciones específicas en función de las necesidades del cliente, como optimización para tipos de células específicos y análisis integrado multiómico.

Escenarios de aplicación

Los servicios de análisis del sitio de integración de genes exógenos tienen una amplia gama de aplicaciones en diversos campos:

Aplicación del servicio de análisis del sitio de integración de genes exógenos

Terapia génica: en la terapia con células CAR-T y la terapia génica mediada por vectores virales, la detección del sitio de integración del gen exógeno ayuda a evaluar el riesgo de mutagénesis por inserción y garantizar la seguridad del tratamiento.

Investigación de organismos transgénicos: en la cría de ganado y cultivos transgénicos agrícolas, el análisis del sitio de integración puede optimizar el diseño de transgenes, mejorar la eficiencia de la expresión y minimizar los efectos no deseados.

Desarrollo de líneas celulares: en el campo biofarmacéutico, se utiliza para caracterizar el estado de integración de genes exógenos en líneas celulares diseñadas (como células CHO) para garantizar una expresión estable y eficiente de la proteína objetivo.

Investigación científica básica: en la investigación de genómica funcional, el análisis del sitio de integración ayuda a dilucidar la función de los genes y los mecanismos reguladores.

Los servicios de análisis del sitio de integración de genes exógenos son una herramienta indispensable de control de calidad y evaluación de seguridad en el campo de la ingeniería genética. A través de un análisis preciso y completo del sitio de integración, no solo garantizan la seguridad de la terapia génica y los organismos genéticamente modificados, sino que también brindan soporte de datos críticos para la investigación científica y las aplicaciones industriales. Con el avance continuo de la tecnología, este servicio desempeñará un papel cada vez más importante en la promoción de la innovación y el desarrollo en biotecnología.

Si está interesado en realizar un pedido, contáctenos
Correo electrónico: ventas@cb-gene.com

Contáctenos

Servicio de análisis del sitio de integración de genes exógenos

Servicio de análisis de sitios de integración de genes exógenos