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Services de tests RT-PCR

réaction en chaîne par polymérase par transcription inverse

Définition

La RT-PCR, abréviation de transcription inverse-réaction en chaîne par polymérase, est une technique de biologie moléculaire extrêmement sensible et puissante. Il combine les processus de transcription inverse et de réaction en chaîne par polymérase pour détecter et quantifier des traces de molécules d'ARN spécifiques.

L’objectif principal est d’inverser la transcription de l’ARN en ADN complémentaire plus stable. La PCR est ensuite utilisée pour amplifier de manière exponentielle cet ADNc, permettant ainsi une détection, une analyse qualitative et quantitative.

Sa valeur fondamentale réside dans la transformation d’une technologie complexe en un produit final standardisé, de haute qualité et à haut rendement, réduisant considérablement les barrières à l’entrée pour les utilisateurs et accélérant les délais de recherche et de projet.

Principe de fonctionnement

La RT-PCR est essentiellement un processus de réaction enzymatique en deux étapes conçu pour l'analyse qualitative ou quantitative de séquences d'ARN spécifiques présentes en quantités infimes.

Étape 1

Transcription inverse (RT)

Traduire le « Langage de l’ARN » en « Langage de l’ADN »

L’étape de transcription inverse utilise la transcriptase inverse, qui utilise l’échantillon d’ARN total comme modèle. Guidé par des amorces spécifiques (amorces Oligo(dT) pour ancrer la queue polyA de l'ARNm, ou hexamères aléatoires pour une capture complète), il catalyse la synthèse d'un brin d'ADN complémentaire, appelé ADN complémentaire (ADNc).

Étape 2

PCR quantitative en temps réel (qPCR）

Amplification exponentielle et surveillance en temps réel des « instructions ADN »

L'ADNc synthétisé lors de la première étape est utilisé comme modèle. Des amorces spécifiques, une ADN polymérase (par exemple, une Taq polymérase thermostable) et un système de rapport fluorescent (décrit ci-dessous) sont ajoutés pour effectuer une amplification PCR cyclique. Chaque cycle comprend : Dénaturation, Recuit et Extension.

Flux de travail standardisé

Un service de test fiable découle d’un contrôle méticuleux des processus. Sa procédure opérationnelle standard (SOP) est résumée visuellement dans l'organigramme ci-dessous, avec des contrôles de qualité intégrés à chaque étape :

Avantages

Sensibilité et spécificité exceptionnelles

Capable de détecter un très faible nombre de copies (même des copies uniques) d'ARN et de discriminer efficacement entre des séquences hautement homologues.

Quantification précise

Fournit des résultats numériques pour la quantification absolue (nombre de copies) ou la quantification relative (changement de pli d’expression), dépassant de loin les méthodes qualitatives traditionnelles.

Débit et efficacité élevés

Le format de plaque à 96 ou 384 puits permet le traitement simultané d'un grand nombre d'échantillons, garantissant ainsi un délai d'exécution rapide.

Technologie mature et standardisée

Des décennies de développement ont abouti à des protocoles robustes qui sont facilement standardisés et mis à l'échelle au niveau du service.

Demande de service

Les services professionnels de tests RT-PCR ont une gamme extrêmement large d’applications, couvrant presque toutes les industries des sciences de la vie et connexes :

Recherche Scientifique Fondamentale :

Profilage de l'expression génétique/exploration des mécanismes moléculaires/recherche sur l'ARN non codant

Diagnostic médical et médecine de précision :

Détection des acides nucléiques pathogènes/typage moléculaire et pronostic du cancer/dépistage et diagnostic des maladies génétiques/découverte de médicaments et validation des biomarqueurs

Agriculture et sécurité alimentaire :

Détection d'organismes génétiquement modifiés (OGM), sélection animale et végétale, diagnostic des maladies animales et végétales

Sciences médico-légales :

Identification des fluides corporels

Les services professionnels de tests RT-PCR démocratisent de puissantes capacités de détection moléculaire grâce à un modèle opérationnel spécialisé et évolutif, les rendant accessibles au-delà de quelques laboratoires d’élite. Caractérisés par leur précision, leur sensibilité, leur efficacité et leur fiabilité, ces services constituent un puissant moteur d’innovation dans les sciences de la vie, faisant progresser la médecine de précision et protégeant la santé publique.

Choisir CB-Gene, c'est choisir une qualité de données fiable, des cycles de projet efficaces et un support analytique approfondi, vous permettant de vous concentrer davantage sur les questions scientifiques elles-mêmes et sur l'expansion de votre cœur de métier. Sur la voie de la percée des mystères de la vie, les services professionnels de tests RT-PCR sont un allié de confiance.

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Email : sales@cb-gene.com

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