¿Qué son los estándares de diagnóstico molecular?

Tecnología de diagnóstico molecular y estándares de diagnóstico molecular.

El diagnóstico molecular es una tecnología que revela el mecanismo de aparición de la enfermedad y ayuda en el diagnóstico, la evaluación del pronóstico y la orientación del tratamiento mediante la detección de las características moleculares (como la secuencia, el nivel de expresión, el estado de metilación, etc.) de los ácidos nucleicos (ADN, ARN) o proteínas en muestras biológicas. Su núcleo radica en el análisis de marcadores de enfermedades a nivel molecular, superando las limitaciones de las pruebas bioquímicas y de patología tradicionales, y tiene alta sensibilidad (nivel de molécula única), alta especificidad y potencial de diagnóstico temprano.

Las tecnologías centrales del diagnóstico molecular incluyen PCR (PCR cuantitativa en tiempo real, PCR digital), secuenciación de genes (NGS, secuenciación de Sanger), hibridación fluorescente in situ (FISH), etc., que se utilizan en enfermedades infecciosas, tratamiento personalizado de tumores (como el análisis de mutaciones de EGFR), enfermedades genéticas (como el diagnóstico del gen de la talasemia) y farmacogenómica.

Los estándares de diagnóstico molecular son materiales de referencia que han sido estrictamente valorados y cuya estabilidad se ha verificado. Se utilizan para calibrar instrumentos, verificar el rendimiento del método y monitorear la calidad de todo el proceso experimental para garantizar la precisión, repetibilidad y comparabilidad entre plataformas de los resultados de las pruebas. Sus tipos incluyen controles positivos/negativos (para verificar la especificidad de la detección), estándares cuantitativos (para establecer curvas estándar) y productos de control de calidad (para monitorear la estabilidad diaria).

Escenarios de aplicación de estándares de diagnóstico molecular.

1. Desarrollo de productos IVD

· Verificación del desempeño: verificar la sensibilidad y especificidad del kit de prueba;

· Solicitud de registro: presentar datos de reacciones cruzadas de estándares.

2. Control de calidad del laboratorio clínico.

· Control de calidad diario: monitoree la eficiencia de la amplificación por PCR y la uniformidad de la profundidad de secuenciación de NGS;

· Comparación interlaboratorios: transferir el valor a través de estándares para lograr el reconocimiento mutuo de los resultados multilaboratorio.

3. Desarrollo de diagnóstico complementario

· Coincidencia de reactivos de diagnóstico complementarios: proporciona estándares de mutación específicos para garantizar la precisión de la predicción de la eficacia de los medicamentos;

· Investigación sobre mecanismos de resistencia a los medicamentos: creación de una biblioteca estándar de mutaciones genéticas de resistencia a los medicamentos.

Proceso de preparación de estándares de diagnóstico molecular.

Matriz de aplicación del cliente de estándares de diagnóstico molecular en la cadena industrial de IVD

Ⅰ. Aguas arriba de la cadena industrial de DIV: 'gobernante' de la fabricación de instrumentos y materias primas

1. Grupo de clientes: fabricantes de equipos de instrumentos (plataforma NGS/qPCR/ddPCR)

Escenario de demanda:

· Verificación del desempeño de nuevos equipos (prueba de sensibilidad/especificidad/repetibilidad);

· Calibración de consistencia de resultados de pruebas multiplataforma.

Selección estándar:

· Estándares compatibles entre plataformas (como estándares cuantitativos universales de ADN);

· Productos de simulación de muestras extremas (alto contenido de GC, ADN fragmentado).

2. Grupo de clientes: proveedor principal de materia prima (enzima, cebador, sonda)

Escenario de demanda:

· Control de calidad del lote de materia prima (como verificación de la actividad de la enzima Taq);

· Evaluación comparativa del desempeño de productos competitivos (prueba de diferencias de sensibilidad de materias primas a través de productos estándar).

Selección estándar:

· Muestras simuladas que contienen inhibidores (verificación de la capacidad antiinterferente);

· Estándares objetivo de baja concentración (detección de extrema sensibilidad de la materia prima).

Ⅱ. Cadena industrial IVD midstream: 'navegador' para el desarrollo de kits

1. Grupo de clientes: empresas de investigación y desarrollo de kits IVD

Escenarios de demanda:

· Etapa de I+D: detección y verificación de objetivos (como pruebas de cobertura de nuevos sitios de mutación);

· Optimización del rendimiento: verificación de sensibilidad/especificidad (determinación de LoD/LoQ);

· Solicitud de registro: proporciona datos rastreables de terceros, como conjuntos de productos estándar con certificados de análisis (COA) de respaldo;

· Inspección de calidad de la producción: pruebas de liberación de lotes, como estándares internos de genes de referencia.

Selección de productos estándar:

· Estándares de verificación del Panel Multiplex PCR/NGS;

· Estándares matriciales complejos (como simulaciones de ctDNA en plasma).

2. Desarrollador del panel de referencia (Panel)

Escenarios de demanda:

· Verificación de reacciones cruzadas de kits de detección conjunta de objetivos múltiples;

· Desarrollo de sustitutos de muestras clínicas (como muestras de simulación FFPE).

Selección de productos estándar:

· Estándares de verificación del Panel Multiplex PCR/NGS;

· Estándares matriciales complejos (como simulaciones de ctDNA en plasma).

Ⅲ. Aguas abajo de la cadena industrial de IVD: 'Guardián' de la aplicación clínica y el control de calidad

1. Grupo de clientes: empresas farmacéuticas (desarrollo de diagnósticos complementarios)

Escenarios de demanda:

· Verificación de correspondencia entre fármaco y biomarcador;

· Monitorización dinámica de mutaciones farmacorresistentes.

Demandas principales:

· Productos estándar desarrollados simultáneamente con los kits CDx;

· Equivalentes de muestras de ensayos clínicos de diagnóstico complementarios.

2. Agencias de pruebas de terceros (LDT/institutos de pruebas médicas)

Escenarios de demanda:

· Control de calidad diario: seguimiento de la precisión intra-lote/entre-lotes;

· Evaluación de la calidad entre laboratorios (EQA): comparación de la coherencia de los resultados entre laboratorios;

· Verificación del límite de detección: confirmación LoD.

3. Laboratorio del hospital/Departamento de patología

Escenarios de demanda:

· Verificación de nuevos proyectos de pruebas (como la verificación hospitalaria del panel NGS de tumores);

· Trazabilidad e interpretación de resultados de informes.

Soluciones para los puntos débiles:

· Productos estándar preenvasados ​​y listos para usar (reducen la complejidad operativa);

· Guía de interpretación rápida (como valor Ct/umbral de interpretación de frecuencia de mutación).

Estándares de diagnóstico molecular de CB-Gene Biotechnology

Los estándares de diagnóstico molecular de tumores de CB-Gene Biotechnology cubren una variedad de tipos de mutaciones, incluidos estándares de mutación, estándares de fusión, estándares CNV (variación del número de copias), estándares MSI (inestabilidad de microsatélites), estándares TMB (carga de mutación tumoral), estándares HRR (reparación por recombinación homóloga), etc. Los productos estándar son ricos en formas, incluidos gDNA (ADN genómico), ctDNA (ADN tumoral circulante), FFPE (fijado con formalina). tejido incluido en parafina). Ya sea un estándar de punto único o un estándar de panel, Kebai Biotechnology controla estrictamente la calidad y mejora el servicio estándar de diagnóstico molecular de la más alta calidad del cliente.