Double norme ADNct/ADNg TMB 22.91 pour IO NGS

Présentation du produit

La norme Dual ctDNA/gDNA TMB 22.91 pour IO NGS est un matériau de référence de pointe conçu pour valider les flux de travail de détection de la charge mutationnelle tumorale (TMB) dans les applications de séquençage de nouvelle génération (NGS) en immuno-oncologie (IO). Cet étalon de référence combine l'ADN génomique (ADNg) avec une valeur TMB calibrée avec précision de 22,91 mutations/Mb , représentant le phénotype TMB élevé cliniquement pertinent associé à la réactivité aux inhibiteurs de points de contrôle immunitaires. L’étalon de référence TMB 22.91 d’ADN tumoral acellulaire (ADNct) doit être personnalisé. Conçue pour imiter le paysage mutationnel complexe des échantillons cliniques, cette norme répond au besoin critique de contrôles validés qui couvrent à la fois l'évaluation du TMB liquide et tissulaire, permettant un étalonnage précis des tests sur l'ensemble du pipeline de diagnostic IO.

Caractéristiques du produit

Diverses formes de produits

Les étalons de référence TMB sont disponibles aux formats  ctDNA (fraction acellulaire) et gDNA (fraction génomique) pour valider les flux de travail TMB. Le composant ADNc subit une fragmentation contrôlée jusqu'à 160-180 pb — imitant la distribution de taille de l'ADN tumoral circulant dans le plasma — tandis que l'ADNg maintient un poids moléculaire élevé (> 20 kb) pour la validation des analyses tissulaires.

Étalonnage de précision du TMB

La valeur de 22,91 mutations/Mb est vérifiée par des méthodes orthogonales, notamment le séquençage de l'exome entier (couverture > 500x) et le séquençage de panel ciblé, garantissant une précision de ± 15 % de la valeur nominale. Ce niveau de précision permet une évaluation fiable de la sensibilité du test pour la détection de TMB élevés, un facteur critique dans la sélection des patients pour l'immunothérapie.

Spectre de mutation cliniquement pertinent

La norme contient un profil mutationnel complet comprenant des substitutions, des indels et des variations du nombre de copies représentatives des tumeurs à TMB élevé. Il couvre plus de 1 500 gènes liés au cancer avec des types de mutations répartis pour refléter les cohortes d'immuno-oncologie du monde réel, y compris les mutations exploitables dans les voies associées à TP53, KRAS et PD-L1.

Usage

Préparation des échantillons

Pour la validation du flux de travail ctDNA, diluez l’étalon à 10-20 ng/μL dans une matrice d’ADN acellulaire dérivée du plasma. Pour les applications d’ADNg, utiliser à raison de 20 à 50 ng/μL dans un fond d’ADN génomique normal. 

Validation du test NGS

Intégrez la norme dans les cycles de validation pour :

• Vérifier la précision du calcul du TMB sur les panels ciblés et WES.

• Établir une limite inférieure de détection pour l'appel de mutation

• Surveiller la variabilité inter-exécutions dans le score TMB

• Valider les pipelines bioinformatiques pour la classification des variantes

Stockage et manutention

Conserver les flacons non ouverts à -80°C pendant 24 mois maximum à compter de la date de fabrication. Après la première utilisation, aliquoter le matériau restant dans des volumes à usage unique et conserver à -80°C pour éviter les cycles de gel-dégel. Décongeler sur la glace pendant 15 minutes avant utilisation et mélanger délicatement en pipetant.

FAQ

Qu’est-ce qui rend cette norme adaptée à la recherche sur les IO ?

La valeur TMB de 22,91 mutations/Mb se situe dans la plage de TMB élevée cliniquement établie associée à la réponse aux inhibiteurs PD-1/PD-L1. Sa conception à double matrice permet la validation des approches de biopsie tissulaire et liquide couramment utilisées dans la recherche en immuno-oncologie et les tests cliniques.

Comment est calculé le TMB pour cette norme ?

Le TMB est calculé comme le nombre total de mutations somatiques non synonymes par mégabase d'ADN séquencé, à l'exclusion des mutations motrices et des variantes germinales. Cette méthodologie s'aligne sur les approches recommandées par la FDA pour l'évaluation du TMB dans les essais cliniques.

Peut-il être utilisé avec des panneaux NGS ciblés ?

Oui, la norme est optimisée pour une utilisation avec des panels d'oncologie courants (50 à 500 gènes). Il inclut un facteur de conversion TMB spécifique au panneau dans le certificat d'analyse pour permettre une comparaison précise entre les différentes tailles et conceptions de panneaux.

La norme contient-elle des variantes germinales ?

Non, la norme est dépourvue de polymorphismes germinaux courants (MAF > 1 %) pour garantir une distinction précise entre les mutations somatiques et les variantes germinales, une exigence essentielle pour le calcul du TMB.

Numéro de cat.	IDENTIFIANT	Valeur TMB	Méthode
CBP80001-1	tTMB-P1	5.37	WES
CBP80001-2	tTMB-P2	9.84	WES
CBP80001-3	tTMB-P3	12.41	WES
CBP80001-4	tTMB-P4	21.09	WES
CBP80001-5	tTMB-P5	27.15	WES
CBP80001-6	tTMB-P6	8.98	WES
CBP80001-7	tTMB-P7	6.83	WES
CBP80001-8	tTMB-P8	27.15	WES
CBP80001-9	tTMB-P9	N / A	WES