Présentation du produit
Le Heterozygots MLH1 Deletion Ref Std pour IVD QC est un matériau de référence méticuleusement caractérisé conçu pour le contrôle qualité des tests de diagnostic détectant les délétions hétérozygotes dans le gène MLH1 , un élément clé du système de réparation des mésappariements (MMR). Cette norme de diagnostic in vitro (IVD) contient de l'ADN génomique avec une délétion hétérozygote confirmée couvrant les exons 5 à 8 de MLH1, imitant les altérations génétiques observées dans le syndrome de Lynch et les cancers colorectaux sporadiques. Fabriqué selon les directives ISO 13485, il fournit une référence cohérente pour valider l'exactitude et la précision des flux de travail de détection de suppression MLH1 dans les laboratoires cliniques. Avec une fréquence allélique de 50 % calibrée avec précision pour l'allèle supprimé, cette norme est essentielle pour garantir des résultats fiables dans les tests de déficit ROR, qui guident les stratégies de dépistage et de prévention du cancer.
Caractéristiques du produit
Architecture de suppression définie
Contient une délétion hétérozygote précise des exons 5 à 8 de MLH1 avec des points d'arrêt bien caractérisés (chr3 : 37035121-37042897), vérifiée par hybridation génomique comparative sur matrice (aCGH) et PCR numérique en gouttelettes (ddPCR). La suppression couvre 7 776 paires de bases , supprimant les régions codantes critiques impliquées dans la formation du complexe MMR. Cela permet une validation précise des limites de détection de suppression et du mappage des points d'arrêt.
Corrélation du phénotype ROR
Dérivé d'une lignée cellulaire dérivée de patients présentant des caractéristiques confirmées de déficit en ROR :
• Instabilité des microsatellites (MSI-H) dans 90 % des marqueurs
• Expression réduite de la protéine MLH1 (30 % des niveaux normaux par IHC)
• Activité de réparation des mésappariements altérée (réduction de 40 % du test fonctionnel)
• Expression PMS2 préservée (pour distinguer un déficit spécifique à MLH1)
Mesures de performance quantitatives
Le standard est quantifié à 50 ng/μL avec des valeurs de nombre de copies vérifiées par ddPCR :
• 1 copie des exons MLH1 5-8 (allèle supprimé)
• 2 copies des exons MLH1 1-4 et 9-19 (régions intactes)
• 2 copies du gène contrôle EIF2C1 (chr1:162214554-162220423)
Cela permet une validation précise des tests de détection de variation du nombre de copies (CNV).
Usage
Validation du test IVD
À utiliser pour valider les méthodes de détection de suppression MLH1, notamment :
• Amplification de sonde multiplex dépendante de la ligature (MLPA)
• Panels NGS ciblés avec algorithmes d'appel CNV
• Tests de quantification par délétion basés sur ddPCR
• Plateformes aCGH
Entrée recommandée : 200 ng d’ADN par test pour des performances optimales.
Mise en œuvre du contrôle qualité
Intégrer aux protocoles de contrôle qualité du laboratoire pour :
• Surveiller les performances des lots de réactifs pour la détection des suppressions
• Vérifier la compétence du technicien dans l'interprétation des profils de suppression MLH1.
• Établir la reproductibilité inter-séries (CV cible <5 %)
• Garantir le respect des exigences CAP/CLIA pour les tests du syndrome de Lynch
Instructions de manipulation
Conserver à -20 °C jusqu'à 36 mois à compter de la date de fabrication. Lors de la première utilisation, aliquoter dans des volumes à usage unique (20 μL) en utilisant une technique stérile. Évitez les cycles répétés de gel-dégel (maximum 3 cycles). Décongeler sur la glace pendant 15 minutes avant utilisation et mélanger délicatement en pipetant.
FAQ
Pourquoi le test de délétion MLH1 est-il important pour le diagnostic du cancer ?
Les délétions hétérozygotes MLH1 provoquent le syndrome de Lynch , une prédisposition héréditaire aux cancers colorectal, endométrial et autres avec des risques à vie allant jusqu'à 70 %. Une détection précise permet des tests prédictifs, un dépistage amélioré et des interventions préventives pour les personnes et les familles à risque .
Comment cette norme prend-elle en charge la conformité réglementaire en matière de DIV ?
Il répond aux exigences FDA et CE IVD pour les matériaux de référence, y compris la traçabilité aux normes internationales, les données de caractérisation complètes et les études de stabilité. La documentation comprend des rapports de validation, des estimations d'incertitude et des caractéristiques de performances sur toutes les plateformes.
Peut-il être utilisé avec les flux de travail de test MSI ?
Oui, le phénotype MSI-H associé permet la validation simultanée des flux de travail de détection de suppression MLH1 et de classification MSI. Cela fournit une solution de contrôle qualité complète pour les laboratoires proposant des tests de déficience ROR combinés.
Quels contrôles sont inclus pour la spécificité du test ?
Chaque norme comprend un contrôle d'ADN génomique de type sauvage issu du même fond génétique, permettant une évaluation parallèle de la spécificité du test, des taux de faux positifs et de la discrimination entre les états de délétion hétérozygotes et homozygotes.
Informations sur le produit |
Norme de référence de suppression MLH1 |
Numéro de catalogue |
CBPR0001 |
Format |
ADN génomique |
Utilisation prévue |
Utilisation pour la recherche uniquement |
Taille de l'unité |
1ug |
Séquençage de Sanger |
Télécharger |
Stockage |
2-8°C |
Expiration |
36 mois à compter de la date de fabrication |
Données techniques
Informations sur le produit |
Norme de référence de suppression MLH1 |
Gène |
MLH1 |
Changement d'ADN |
N / A |
Changement AA |
N / A |
Zygosité |
Hétérozygote |
Fréquence allélique |
50% |
Position Chr (GRCh37) |
chr3:37051418-37078384 del |
Tampon |
Tris-EDTA |
Application du produit
1.Évaluer la stabilité de l'expérience et du processus d'analyse
2. Produits de référence/contrôle de qualité négatifs et négatifs
