Double mutation β-thalassémie Réf. Std Recherche

Présentation du produit

Le Double Mutation β-Thalassemia Ref Std Research est un matériau de référence spécialisé conçu pour valider les flux de travail de recherche portant sur les génotypes complexes de la β-thalassémie. Ce standard contient de l'ADN génomique avec deux mutations cliniquement significatives du gène de la β-globine : IVS-II-110 (G>A) et Codon 39 ( C>T ) , présents à l'état hétérozygote composé. Ces mutations représentent l’une des combinaisons de mutations les plus répandues associées à la β-thalassémie intermédiaire dans les populations d’Asie du Sud-Est, où ce génotype représente environ 35 % des cas de β-thalassémie cliniquement significatifs. Conçue pour imiter la complexité génétique des échantillons cliniques, cette norme permet une validation précise des tests de détection multimutation utilisés dans la recherche et le développement thérapeutique sur la β-thalassémie.

Caractéristiques du produit

Représentation complexe du génotype

Porte deux mutations pathogènes de la β-thalassémie en configuration trans :

• IVS-II-110 (G>A)  (Changement d'ADN : c.93-21G>A)

• Codon 39 ( C>T ) ( Changement d'ADN : c.118C>T )

Chaque mutation est quantifiée à une fréquence allélique d’environ 50 % par ddPCR, reflétant l’état hétérozygote composé. L'état de mutation est vérifié par analyse d'haplotype pour confirmer la configuration trans.

Validation de la plateforme

La détection des mutations est confirmée sur plusieurs plateformes de recherche :

• NGS à lecture longue (couverture > 100 x sur l'ensemble du groupe de gènes HBB)

• Séquençage Sanger du gène β-globine (exon 1-3 et régions adjacentes)

Format prêt pour la recherche

Purifié pour prendre en charge les applications de recherche avancées :

• ADN de haut poids moléculaire (> 40 kb) adapté au séquençage à lecture longue

• <0,001 % de contamination microbienne (vérifiée par PCR ARNr 16S)

• Modifications épigénétiques préservées dans la région de contrôle du locus β-globine

• Compatible avec les workflows d'évaluation de l'efficacité de l'édition CRISPR

Usage

Développement de tests

Utiliser à une entrée de 100 ng pour l’optimisation des tests de détection multi-mutation :

• Concevoir et valider des panels PCR multiplex

• Optimiser la préparation de la bibliothèque NGS à partir d'échantillons de faible qualité

• Établir des pipelines bioinformatiques pour l'appel de génotypes complexes

• Développer des méthodes de quantification spécifiques aux allèles

Applications de recherche thérapeutique

Intégrer à la recherche en thérapie génique pour :

• Valider l'efficacité de l'édition génétique pour les deux mutations

• Évaluer les changements d'expression spécifiques aux allèles

• Surveiller les effets hors cible lors de l'édition du locus β-globine

• Standardiser les tests fonctionnels de la production d'hémoglobine

Exigences de stockage

Conserver à 2-8°C dans son emballage d’origine jusqu’à 36 mois. Après la première utilisation, aliquoter dans des volumes à usage unique (50 μL) et conserver à -80°C. Évitez plus de 2 cycles de gel-dégel. Décongeler sur la glace pendant 20 minutes avant utilisation et mélanger délicatement en pipetant.

FAQ

Pourquoi cette combinaison de double mutation est-elle cliniquement importante ?

Le IVS-II-110 /Codon 39 génotype entraîne généralement une β-thalassémie intermédiaire, caractérisée par une anémie modérée nécessitant des transfusions occasionnelles. Ce génotype présente une gravité clinique variable, ce qui en fait un modèle important pour étudier les gènes modificateurs et développer des thérapies ciblées.

Comment cette norme soutient-elle la reproductibilité de la recherche ?

Il fournit une référence cohérente pour comparer les résultats des études portant sur les génotypes complexes de la β-thalassémie. Les fréquences de mutation définies permettent un étalonnage précis des tests quantitatifs, réduisant ainsi la variabilité interlaboratoire dans la détection des mutations et l'analyse de l'expression.

Peut-il être utilisé pour la validation des méthodes de diagnostic prénatal ?

Oui, la norme convient à la validation des méthodes de tests prénatals non invasifs (NIPT) pour la β-thalassémie, y compris l'analyse de l'ADN acellulaire. Il permet d'évaluer la sensibilité du test pour détecter les deux mutations dans des milieux d'ADN mixtes.

Quelles données de caractérisation supplémentaires sont fournies ?

Chaque lot comprend une analyse complète des haplotypes du groupe de gènes de la β-globine (HBB, HBD, HBG1, HBG2), un profilage de méthylation de la région de contrôle du locus et des données d'expression provenant de modèles de culture de cellules progénitrices érythroïdes.