ADN genómico α-talasemia αα/--SEA Std

Descripción general del producto

El ADN genómico α-talasemia αα/--SEA Std es un material de referencia altamente caracterizado diseñado para validar los flujos de trabajo de pruebas genéticas para la α-talasemia, un trastorno de hemoglobina hereditario común. Este estándar contiene ADN genómico con el genotipo αα/--SEA , que representa el rasgo de α-talasemia más prevalente en las poblaciones del sudeste asiático, donde las frecuencias de portadores pueden superar el 15% en grupos de alto riesgo. Diseñado para imitar muestras clínicas, este estándar permite una calibración precisa de ensayos de diagnóstico para detectar la deleción del sudeste asiático (SEA), una alteración genética crítica responsable de aproximadamente el 70 % de los casos de α-talasemia en regiones endémicas. Sirve como una herramienta de control de calidad esencial para los laboratorios que realizan pruebas de detección de portadores, diagnóstico prenatal y pruebas de hemoglobinopatías en recién nacidos.

Características del producto

Genotipo clínicamente relevante

El estándar lleva el genotipo de deleción αα/--SEA , que consta de dos genes de α-globina normales (αα) en un cromosoma 16 y una deleción completa de ambos genes de α-globina (--SEA) en el cromosoma homólogo. Este genotipo representa el rasgo de α-talasemia más común, asociado con una producción reducida de la cadena de α-globina y una anemia microcítica leve. El punto de interrupción de eliminación (chr16:215396-234699 del) se asigna con precisión utilizando la matriz CGH de alta resolución.

Validado ortogonalmente

El estado de eliminación de SEA se verifica mediante múltiples métodos complementarios:

• Gap-PCR con cebadores específicos de alelo (especificidad >99 %)

• Secuenciación de próxima generación (cobertura >300x en todo el locus de globina α)

Compatibilidad de matrices

Purificado a partir de sangre completa mediante protocolos estandarizados para mantener las características nativas del ADN, que incluyen:

• ADN genómico de alto peso molecular

• <0,1 ng/μL de contaminación por ARN residual

• Compatible con todos los métodos comunes de extracción y amplificación de ADN

Uso

Preparación de muestras

Reconstituya el estándar en 200 μL de tampón TE (pH 8,0) para lograr una concentración de trabajo de 50 ng/μL . Deje rehidratar a temperatura ambiente durante 20 minutos mezclando suavemente. Prepare diluciones en serie (1-100 ng/μL) para establecer la linealidad del ensayo y el límite de detección.

Validación del ensayo

Incorporar en ejecuciones de validación para:

• Verificar la precisión de la detección de eliminación de SEA en todas las plataformas

• Establecer condiciones óptimas de ciclos de PCR para ensayos de gap-PCR

• Monitorear la variabilidad entre ejecuciones en la llamada de genotipo

Entrada recomendada: 50-100 ng de ADN por reacción para métodos basados ​​en PCR.

Almacenamiento

Guarde los viales sin abrir a una temperatura de entre 2 y 8 °C durante un máximo de 36 meses desde la fecha de fabricación. 

Preguntas frecuentes

¿Qué hace que la eliminación de SEA sea clínicamente significativa?

La deleción de -SEA elimina ambos genes de α-globina de un cromosoma, lo que reduce la producción total de α-globina en un 50% en los portadores (αα/--SEA). Si bien los portadores suelen ser asintomáticos, las parejas en las que ambos miembros tienen rasgos de α-talasemia tienen un riesgo del 25 % de tener un hijo con enfermedad grave de hemoglobina H o hidropesía fetal.

¿Cómo mejora este estándar la validación del ensayo?

Proporciona una referencia bien caracterizada con un genotipo conocido, lo que permite a los laboratorios verificar su capacidad para identificar correctamente la deleción SEA y distinguirla de otras mutaciones de α-talasemia (deleciones de 3,7 kb, 4,2 kb). Esto es fundamental para una detección precisa de portadores y un diagnóstico prenatal.

¿Se puede utilizar con paneles NGS?

Sí, el estándar está optimizado para su uso con paneles NGS de hemoglobinopatía, lo que proporciona una cobertura uniforme en todo el grupo de genes de α-globina (HBZ, HBA2, HBA1). Incluye un informe de validación de cobertura para paneles comerciales comunes (Illumina TruSight Hemato, Thermo Fisher Oncomine Myeloid Assay).

¿Se incluye un control de tipo salvaje?

Cada lote incluye un control de ADN genómico de tipo salvaje (genotipo αα/αα) del mismo origen étnico, lo que permite la validación simultánea de la especificidad del ensayo y la diferenciación entre genotipos normales y portadores.