जीनोमिक डीएनए α-थैलेसीमिया αα/--SEA मानक

उत्पाद अवलोकन

जीनोमिक डीएनए α-थैलेसीमिया αα/--SEA Std एक उच्च विशेषता वाली संदर्भ सामग्री है जिसे α-थैलेसीमिया, एक सामान्य विरासत में मिला हीमोग्लोबिन विकार, के लिए आनुवंशिक परीक्षण वर्कफ़्लो को मान्य करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। इस मानक में वाला जीनोमिक डीएनए शामिल है αα/--SEA जीनोटाइप , जो दक्षिण पूर्व एशियाई आबादी में सबसे प्रचलित α-थैलेसीमिया लक्षण का प्रतिनिधित्व करता है, जहां उच्च जोखिम वाले समूहों में वाहक आवृत्ति 15% से अधिक हो सकती है। नैदानिक ​​​​नमूनों की नकल करने के लिए इंजीनियर किया गया, यह मानक दक्षिणपूर्व एशियाई (एसईए) विलोपन का पता लगाने के लिए नैदानिक ​​​​परीक्षणों के सटीक अंशांकन को सक्षम बनाता है, जो स्थानिक क्षेत्रों में लगभग 70% α-थैलेसीमिया मामलों के लिए जिम्मेदार एक महत्वपूर्ण आनुवंशिक परिवर्तन है। यह वाहक स्क्रीनिंग, प्रसवपूर्व निदान और हीमोग्लोबिनोपैथी के लिए नवजात परीक्षण करने वाली प्रयोगशालाओं के लिए एक आवश्यक गुणवत्ता नियंत्रण उपकरण के रूप में कार्य करता है।

उत्पाद की विशेषताएँ

चिकित्सकीय रूप से प्रासंगिक जीनोटाइप

मानक में αα/--SEA विलोपन जीनोटाइप होता है , जिसमें एक गुणसूत्र 16 पर दो सामान्य α-ग्लोबिन जीन (αα) होते हैं और समजात गुणसूत्र पर दोनों α-ग्लोबिन जीन (--SEA) का पूर्ण विलोपन होता है। यह जीनोटाइप सबसे आम α-थैलेसीमिया लक्षण का प्रतिनिधित्व करता है, जो कम α-ग्लोबिन श्रृंखला उत्पादन और हल्के माइक्रोसाइटिक एनीमिया से जुड़ा है। विलोपन ब्रेकप्वाइंट (chr16:215396-234699 del) को उच्च-रिज़ॉल्यूशन सरणी CGH का उपयोग करके सटीक रूप से मैप किया गया है।

ऑर्थोगोनली मान्य

एसईए विलोपन स्थिति को कई पूरक तरीकों से सत्यापित किया जाता है:

• एलील-विशिष्ट प्राइमरों के साथ गैप-पीसीआर (>99% विशिष्टता)

• अगली पीढ़ी का अनुक्रमण (>α-ग्लोबिन लोकस में 300x कवरेज)

मैट्रिक्स संगतता

मूल डीएनए विशेषताओं को बनाए रखने के लिए मानकीकृत प्रोटोकॉल का उपयोग करके संपूर्ण रक्त से शुद्ध किया गया, जिसमें शामिल हैं:

• उच्च आणविक भार जीनोमिक डीएनए

• <0.1 एनजी/μL अवशिष्ट आरएनए संदूषण

• सभी सामान्य डीएनए निष्कर्षण और प्रवर्धन विधियों के साथ संगत

प्रयोग

नमूना तैयार करना

की कार्यशील सांद्रता प्राप्त करने के लिए 200 μL TE बफर (पीएच 8.0) में मानक का पुनर्गठन करें 50 एनजी/μL । हल्के मिश्रण के साथ 20 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर पुनः हाइड्रेट होने दें। परख रैखिकता और पता लगाने की सीमा स्थापित करने के लिए क्रमिक तनुकरण (1-100 एनजी/μL) तैयार करें।

परख सत्यापन

सत्यापन में शामिल करें:

• सभी प्लेटफार्मों पर एसईए विलोपन पहचान सटीकता को सत्यापित करें

• गैप-पीसीआर परख के लिए इष्टतम पीसीआर साइक्लिंग स्थितियां स्थापित करें

• जीनोटाइप कॉलिंग में अंतर-रन परिवर्तनशीलता की निगरानी करें

अनुशंसित इनपुट: पीसीआर-आधारित विधियों के लिए प्रति प्रतिक्रिया 50-100 एनजी डीएनए।

भंडारण

बंद शीशियों को 2-8 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। निर्माण तिथि से 36 महीने तक  

अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न

एसईए विलोपन को चिकित्सीय दृष्टि से क्या महत्वपूर्ण बनाता है?

--SEA विलोपन एक गुणसूत्र से दोनों α-ग्लोबिन जीन को हटा देता है, जिससे वाहकों में कुल α-ग्लोबिन उत्पादन 50% कम हो जाता है (αα/--SEA)। जबकि वाहक आम तौर पर स्पर्शोन्मुख होते हैं, जिन जोड़ों के दोनों भागीदारों में α-थैलेसीमिया लक्षण होते हैं, उनमें गंभीर हीमोग्लोबिन एच रोग या हाइड्रोप्स फेटालिस वाले बच्चे होने का 25% जोखिम होता है।

यह मानक परख सत्यापन में कैसे सुधार करता है?

यह ज्ञात जीनोटाइप के साथ एक अच्छी तरह से विशेषता वाला संदर्भ प्रदान करता है, जो प्रयोगशालाओं को एसईए विलोपन की सही पहचान करने और इसे अन्य α-थैलेसीमिया उत्परिवर्तन (3.7 केबी, 4.2 केबी विलोपन) से अलग करने की उनकी क्षमता को सत्यापित करने में सक्षम बनाता है। यह सटीक वाहक जांच और प्रसवपूर्व निदान के लिए महत्वपूर्ण है।

क्या इसका उपयोग एनजीएस पैनलों के साथ किया जा सकता है?

हां, मानक को हीमोग्लोबिनोपैथी एनजीएस पैनल के साथ उपयोग के लिए अनुकूलित किया गया है, जो α-ग्लोबिन जीन क्लस्टर (HBZ, HBA2, HBA1) में एक समान कवरेज प्रदान करता है। इसमें सामान्य वाणिज्यिक पैनलों (इलुमिना ट्रूसाइट हेमाटो, थर्मो फिशर ऑनकोमाइन माइलॉयड परख) के लिए एक कवरेज सत्यापन रिपोर्ट शामिल है।

क्या जंगली प्रकार का नियंत्रण शामिल है?

प्रत्येक लॉट में एक ही जातीय पृष्ठभूमि से एक मिलान जंगली-प्रकार जीनोमिक डीएनए नियंत्रण (αα/αα जीनोटाइप) शामिल होता है, जो सामान्य और वाहक जीनोटाइप के बीच परख विशिष्टता और भेदभाव के एक साथ सत्यापन की अनुमति देता है।