Descripción general del producto
El GJB2 p.G4D Genomic DNA Ref Std es un material de referencia meticulosamente caracterizado diseñado para el control de calidad de rutina de los flujos de trabajo de pruebas genéticas clínicas dirigidas a la mutación p.G4D en el gen GJB2, una causa principal de pérdida auditiva hereditaria. Este estándar contiene ADN genómico con una mutación heterocigótica p.G4D (c.10G>A) con una frecuencia de alelo mutante del 50 % calibrada con precisión , que representa el perfil genético de los individuos afectados. Fabricado para imitar las características de la matriz de las muestras clínicas, proporciona una referencia consistente para validar la precisión y reproducibilidad de los ensayos de detección de mutaciones GJB2 en laboratorios de diagnóstico. Con documentación completa que respalda el cumplimiento normativo, este estándar es una herramienta esencial para garantizar resultados confiables en las pruebas genéticas de la pérdida auditiva.
Características del producto
Referencia de mutación de grado diagnóstico
Contiene la mutación patógena p.G4D en estado heterocigoto, la variante GJB2 más común en varias poblaciones globales. La mutación se verifica mediante secuenciación de Sanger con una precisión >99,9 % y PCR de gotitas digitales que confirma la frecuencia del alelo mutante del 50 % (tolerancia de ±3 %). Esto permite una calibración precisa de los umbrales de diagnóstico para la llamada de mutaciones.
Autenticidad de la matriz
Procesado a partir de sangre total mediante protocolos de extracción clínica estándar para preservar:
• Patrón de fragmentación del ADN nativo (promedio de 15 a 20 kb)
• Estructura natural del nucleosoma
• Niveles típicos de metilación de citosina en la región promotora GJB2
• Inhibidores endógenos de la PCR en concentraciones fisiológicas (≤0,5 ng/μL de hemoglobina)
Métricas de control de calidad
Cada lote se somete a rigurosas pruebas que incluyen:
• Pruebas de estabilidad en condiciones de envío simuladas
• Evaluación de la variabilidad entre lotes (coeficiente de variación <5%)
• Pruebas de compatibilidad con kits de ensayos clínicos comunes
• Verificación de la estabilidad del almacenamiento a largo plazo
El certificado de análisis incluye características de rendimiento detalladas en múltiples plataformas.
Uso
Implementación de control de calidad de rutina
Inclúyalo en cada ejecución de diagnóstico como control externo con una entrada de 20 ng por reacción . Úselo para:
• Verificar el rendimiento del ensayo en cada día de prueba.
• Supervisar la competencia del técnico
• Detectar variaciones de reactivo entre lotes
• Garantizar la estabilidad de la calibración del instrumento
Estudios de Validación
Incorporar en la validación del ensayo para demostrar:
• Sensibilidad analítica (tasa de detección >99%)
• Especificidad analítica (>99% de precisión)
• Reproducibilidad entre series (CV <3%)
• Robustez en rangos de entrada aceptables (10-50 ng de ADN)
Instrucciones de preparación
Reconstituya el ADN liofilizado en 100 μl de agua de grado de biología molecular para lograr una concentración de trabajo de 50 ng/μl . Deje reposar a temperatura ambiente durante 15 minutos, luego mezcle suavemente por inversión. No agite. Guarde las alícuotas reconstituidas a -20 °C hasta por 6 meses.
Preguntas frecuentes
¿Por qué es importante la prueba GJB2 para el diagnóstico de pérdida auditiva?
Las mutaciones GJB2 representan entre el 20% y el 50% de los casos de pérdida auditiva congénita no sindrómica en todo el mundo, lo que la convierte en la causa genética más común. La detección precisa de mutaciones como p.G4D permite un diagnóstico definitivo, un cálculo del riesgo de recurrencia y un tratamiento adecuado, incluidos los servicios de intervención temprana.
¿Cómo respalda esta norma el cumplimiento normativo?
Cumple con los requisitos CLIA y CAP para controles de calidad externos y proporciona valores de referencia rastreables con estimaciones de incertidumbre. La documentación completa incluye datos de validación de métodos, estudios de estabilidad y características de rendimiento en todas las plataformas para respaldar las presentaciones regulatorias.
¿Se puede utilizar con todos los métodos de prueba GJB2?
Sí, el estándar está validado para su uso con todos los métodos clínicos comunes, incluida la PCR específica de alelo, los ensayos TaqMan, la secuenciación de Sanger y los paneles NGS específicos. Los datos de rendimiento de cada método se proporcionan en el certificado de análisis.
¿Cuál es la vida útil en diferentes condiciones?
Los viales sin abrir son estables a -20°C durante 36 meses. Después de la reconstitución:
• Almacenamiento a -20°C: estable durante 6 meses (hasta 3 ciclos de congelación y descongelación)
• Almacenamiento a 4°C: estable durante 30 días
• Temperatura ambiente: estable durante 8 horas (≤25°C)
Información del producto |
Estándar de referencia de eliminación de EPCAM |
ID de catálogo |
CBPR0002 |
Formato |
ADN genómico |
Uso previsto |
Sólo para uso en investigación |
Tamaño de la unidad |
1ug |
Secuenciación de Sanger |
Descargar |
Almacenamiento |
2-8°C |
Expiración |
36 meses desde la fecha de fabricación. |
Datos técnicos
Información del producto |
Estándar de referencia de eliminación de EPCAM |
Gene |
EPCAM |
Cambio de ADN |
N / A |
Cambio AA |
N / A |
cigosidad |
heterocigoto |
Frecuencia alélica |
50% |
Posición del reloj (GRCh37) |
chr2:47611950-47614370 del |
Buffer |
Tris-EDTA |
Aplicación del producto
1.Evaluar la estabilidad del experimento y el proceso de análisis.
2.Productos de control de calidad/referencia negativos y negativos
