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TF (ऊतक कारक) , जिसे के रूप में भी जाना जाता है जमावट कारक III या CD142 , मानव गुणसूत्र 1 पर स्थित F3 जीन द्वारा एन्कोड किया गया है । F3 जीन लगभग 12.4 kb लंबाई का है और 295-एमिनो-एसिड प्रोटीन को एन्कोड करता है जिसमें तीन प्रमुख संरचनात्मक क्षेत्र होते हैं: एक बाह्य डोमेन, एक ट्रांसमेम्ब्रेन डोमेन और एक साइटोप्लाज्मिक डोमेन।
शारीरिक रूप से, टीएफ के प्रमुख आरंभकर्ता के रूप में कार्य करता है बाहरी जमावट मार्ग । संवहनी या ऊतक की चोट के बाद, टीएफ सक्रिय जमावट कारक VII (FVIIa) से जुड़कर TF-FVIIa कॉम्प्लेक्स बनाता है, जिससे जमावट कैस्केड शुरू होता है और हेमोस्टेसिस के लिए फाइब्रिन गठन को बढ़ावा मिलता है।
ऑन्कोलॉजी अनुसंधान में, टीएफ सहित विभिन्न प्रकार के ठोस ट्यूमर में असामान्य रूप से व्यक्त किया गया है गर्भाशय ग्रीवा, स्तन, फेफड़े, प्रोस्टेट और डिम्बग्रंथि के कैंसर , और ट्यूमर आक्रमण, मेटास्टेसिस और खराब नैदानिक परिणामों से जुड़ा हुआ है। टीएफ एक तेजी से जांचे जाने वाले एंटीबॉडी-ड्रग कंजुगेट (एडीसी) लक्ष्य के रूप में भी उभरा है.
टीएफ-लक्षित एडीसी का विकास अपेक्षाकृत हाल ही में हुआ है। के अनुमोदन और टिवडैक (टिसोटुमैब वेदोटिन) के नैदानिक विकास के बाद एमआरजी004ए , टीएफ ने उन्नत ठोस ट्यूमर के लिए संभावित चिकित्सीय लक्ष्य के रूप में दवा कंपनियों और अनुसंधान संस्थानों का ध्यान आकर्षित किया है।
इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आईएचसी) ऊतक नमूनों में टीएफ प्रोटीन अभिव्यक्ति के मूल्यांकन के लिए एक महत्वपूर्ण विधि है। हालाँकि, IHC परिणाम एंटीबॉडी प्रदर्शन, एंटीजन पुनर्प्राप्ति स्थितियों, धुंधला मापदंडों और समग्र परख वर्कफ़्लो से महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित हो सकते हैं।
टीएफ पॉजिटिव/नेगेटिव डुअल-कंट्रोल एफएफपीई मानक, सीबीपीएन0079 , एक ही पैराफिन ब्लॉक के भीतर टीएफ-पॉजिटिव और टीएफ-नेगेटिव ऊतक क्षेत्रों को जोड़ता है। इसे विशेष रूप से टीएफ-आईएचसी एंटीबॉडी सत्यापन, परख गुणवत्ता नियंत्रण और धुंधला स्थितियों के अनुकूलन के लिए डिज़ाइन किया गया है.
एक ही एफएफपीई ब्लॉक में सकारात्मक और नकारात्मक दोनों नियंत्रणों को शामिल करके, सीबीपीएन0079 प्रयोगात्मक परिवर्तनशीलता को कम करते हुए परख संवेदनशीलता और विशिष्टता का एक साथ मूल्यांकन करने में सक्षम बनाता है। यह उत्पाद टीएफ लक्ष्य अनुसंधान, एंटीबॉडी विकास, आईएचसी परख विकास और टीएफ-लक्षित एडीसी अनुसंधान और साथी निदान विकास में पद्धतिगत सत्यापन के लिए उपयुक्त है।.
| पैरामीटर | विनिर्देश | विवरण |
उत्पाद संख्या |
सीबीपीएन0079 |
अद्वितीय उत्पाद पहचानकर्ता. संबंधित सीओए या तकनीकी सहायता का अनुरोध करते समय कृपया यह उत्पाद संख्या प्रदान करें। |
उत्पाद प्रारूप |
एफएफपीई पैराफिन ब्लॉक |
फॉर्मेलिन-फिक्स्ड, पैराफिन-एम्बेडेड (एफएफपीई) ऊतक ब्लॉक, एक मानक नमूना प्रारूप जो व्यापक रूप से पैथोलॉजी और आईएचसी अनुप्रयोगों में उपयोग किया जाता है। |
ब्लॉक की मोटाई |
4 मिमी |
पैराफिन ब्लॉक की मोटाई ही 4 मिमी है। IHC के लिए, ब्लॉक को मानक 3-5 μm ऊतक अनुभागों में विभाजित किया जाना चाहिए । इच्छित नियंत्रण फ़ंक्शन को प्रभावित किए बिना सेल सामग्री अलग-अलग नमूनों और बैचों के बीच भिन्न हो सकती है। |
मान्य एंटीबॉडी |
ऊतक कारक पुनः संयोजक खरगोश एमएबी (एस-893-34); स्टैड्ट, बिल्ली। नं. S0B0577 |
इस एंटीबॉडी का उपयोग करके आईएचसी द्वारा एफएफपीई मानक को मान्य किया गया है। मान्य एंटीबॉडी और शर्तों को प्रयोगात्मक सेटअप के लिए संदर्भ के रूप में उपयोग किया जा सकता है। उत्पाद का उपयोग घर में विकसित या अन्य निर्माताओं द्वारा आपूर्ति की गई टीएफ एंटीबॉडी का मूल्यांकन करने के लिए भी किया जा सकता है। |
उपयोग का उद्देश्य |
केवल अनुसंधान उपयोग (आरयूओ) |
केवल अनुसंधान के लिए उपयोग करें। प्रत्यक्ष नैदानिक निदान उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। |
भंडारण |
-25°C से -15°C |
पैराफिन ब्लॉक को जमी हुई परिस्थितियों में संग्रहित करें और बार-बार जमने-पिघलने के चक्र से बचें। कमरे के तापमान पर लंबे समय तक भंडारण के परिणामस्वरूप एंटीजन हानि या ऊतक क्षति हो सकती है और नियंत्रण प्रदर्शन से समझौता हो सकता है। |
शेल्फ जीवन |
निर्माण की तारीख से 36 महीने |
निर्दिष्ट शेल्फ जीवन के भीतर उपयोग करें। सेक्शनिंग के बाद, जितनी जल्दी हो सके धुंधलापन किया जाना चाहिए। |
मुख्य विशिष्टता नोट्स
1.भंडारण तापमान
उत्पाद को -25°C से -15°C पर जमाकर संग्रहित किया जाना चाहिए । 4°C या कमरे के तापमान पर लंबे समय तक भंडारण की अनुशंसा नहीं की जाती है। अनुचित भंडारण से टीएफ एंटीजेनेसिटी में गिरावट या हानि हो सकती है, जिसके परिणामस्वरूप सकारात्मक क्षेत्रों में धुंधलापन की तीव्रता कम हो सकती है और नियंत्रण के प्रदर्शन से समझौता हो सकता है।
निर्दिष्ट 4 मिमी मोटाई पैराफिन ब्लॉक की भौतिक मोटाई को संदर्भित करती है, न कि आईएचसी अनुभाग की मोटाई को.
आईएचसी विश्लेषण के लिए, एफएफपीई ब्लॉक को पतले ऊतक वर्गों में विभाजित किया जाना चाहिए, आमतौर पर 3-5 माइक्रोन , और सकारात्मक चार्ज या अन्य उपयुक्त आसंजन स्लाइड पर लगाया जाना चाहिए।
कथन 'सेल सामग्री भिन्न हो सकती है' ऊतक-आधारित एफएफपीई संदर्भ सामग्री के लिए एक मानक विनिर्देश है। विनिर्माण बैचों के बीच ऊतक या कोशिका संरचना में मामूली बदलाव हो सकते हैं। अपेक्षित सकारात्मक/नकारात्मक अभिव्यक्ति विशेषताओं को बैच रिलीज़ के दौरान सत्यापित किया जाता है और अपेक्षित नियंत्रण फ़ंक्शन को प्रभावित करने की उम्मीद नहीं की जाती है।
CBPN0079 को IHC द्वारा टिश्यू फैक्टर रीकॉम्बिनेंट रैबिट mAb (S-893-34), कैट का उपयोग करके मान्य किया गया है। नं. S0B0577.
IHC परख स्थापित करते समय मान्य एंटीबॉडी और संबंधित धुंधला स्थितियों को संदर्भ के रूप में उपयोग किया जा सकता है। अन्य टीएफ एंटीबॉडी का उपयोग करते समय, उपयोगकर्ताओं को प्रासंगिक धुंधला स्थितियों को स्वतंत्र रूप से अनुकूलित करना चाहिए।
CBPN0079 को के बाद जारी किया गया है TF-IHC स्टेनिंग सत्यापन । एफएफपीई ब्लॉक में टीएफ-पॉजिटिव और टीएफ-नेगेटिव दोनों ऊतक क्षेत्र शामिल हैं , जो एकल पैराफिन ब्लॉक के भीतर एक एकीकृत सकारात्मक/नकारात्मक नियंत्रण प्रदान करते हैं।
सकारात्मक ऊतक क्षेत्र में स्पष्ट और विशिष्ट टीएफ धुंधलापन प्रदर्शित होने की उम्मीद है, जिसमें मुख्य रूप से कोशिका झिल्ली और/या साइटोप्लाज्म में स्थानीयकृत धुंधलापन होता है , जबकि आसपास के ऊतकों में गैर-विशिष्ट पृष्ठभूमि धुंधलापन कम रहता है।
सकारात्मक नियंत्रण क्षेत्र का उपयोग यह आकलन करने के लिए किया जा सकता है कि एंटीजन पुनर्प्राप्ति, प्राथमिक एंटीबॉडी ऊष्मायन और क्रोमोजेनिक पहचान सहित समग्र आईएचसी वर्कफ़्लो ठीक से काम कर रहा है या नहीं।
सामान्य सकारात्मक धुंधलापन: इंगित करता है कि IHC वर्कफ़्लो परीक्षण की गई स्थितियों के तहत लक्ष्य TF एंटीजन का पता लगाने में सक्षम है।
अनुपस्थित या स्पष्ट रूप से कम सकारात्मक धुंधलापन: अपर्याप्त एंटीजन पुनर्प्राप्ति, कम एंटीबॉडी गतिविधि, अपर्याप्त एंटीबॉडी ऊष्मायन, या अन्य परख-संबंधी कारकों जैसे मुद्दों का संकेत दे सकता है।
नकारात्मक ऊतक क्षेत्र में कोई विशिष्ट टीएफ धुंधलापन नहीं दिखना चाहिए, केवल न्यूनतम पृष्ठभूमि धुंधलापन अपेक्षित है।
इस क्षेत्र का उपयोग IHC परख के भीतर गैर-विशिष्ट धुंधलापन के स्तर का आकलन करने के लिए किया जाता है।
नकारात्मक क्षेत्र में प्रमुख धुंधलापन: गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी बाइंडिंग, अपर्याप्त अवरोधन, अत्यधिक क्रोमोजेनिक विकास, या अन्य परख-संबंधित मुद्दों का संकेत दे सकता है। प्रायोगिक नमूनों की व्याख्या करने से पहले ऐसे परिणामों का सावधानीपूर्वक मूल्यांकन किया जाना चाहिए।
पर्याप्त सकारात्मक धुंधलापन के साथ नकारात्मक क्षेत्र को साफ करें: परीक्षण की गई स्थितियों के तहत अच्छी परख विशिष्टता और उचित आईएचसी प्रदर्शन का समर्थन करता है।
सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण ऊतकों को एक ही एफएफपीई ब्लॉक में शामिल किया गया है और उसी ऊतक अनुभाग पर इसका मूल्यांकन किया जा सकता है । यह सुनिश्चित करता है कि सेक्शनिंग, डीपराफिनाइजेशन, एंटीजन पुनर्प्राप्ति, एंटीबॉडी ऊष्मायन और क्रोमोजेनिक विकास समान प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत किया जाता है।
अलग-अलग सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण ब्लॉकों की तुलना में, दोहरे नियंत्रण डिज़ाइन ऊतक अनुभागों और प्रयोगात्मक रनों के बीच अंतर के कारण होने वाली परिवर्तनशीलता को कम करता है।
यह प्रारूप इनके लिए विशेष रूप से उपयोगी है:
IHC परख अनुकूलन
एंटीबॉडी प्रदर्शन तुलना
एंटीबॉडी स्क्रीनिंग
धुंधलापन की स्थिति का अनुकूलन
अंतर-बैच परख स्थिरता मूल्यांकन
नियमित प्रयोगशाला IHC गुणवत्ता नियंत्रण
CBPN0079 का उपयोग TF-संबंधित अनुसंधान और परख विकास अनुप्रयोगों की एक श्रृंखला में किया जा सकता है, जिनमें शामिल हैं:
IHC अनुप्रयोगों के लिए TF-लक्षित एंटीबॉडी का मूल्यांकन और स्क्रीनिंग।
एंटीजन पुनर्प्राप्ति स्थितियों, एंटीबॉडी सांद्रता, ऊष्मायन समय और अन्य महत्वपूर्ण धुंधला मापदंडों का अनुकूलन।
का समर्थन करने वाले टीएफ-आईएचसी परख का विकास और पद्धतिगत सत्यापन टीएफ-लक्षित एडीसी अनुसंधान और साथी नैदानिक विकास .
आंतरिक प्रयोगशाला गुणवत्ता नियंत्रण और आईएचसी परख प्रदर्शन और वर्कफ़्लो स्थिरता की निगरानी।
ट्यूमर के ऊतकों और टीएफ से जुड़े जैविक तंत्रों में टीएफ अभिव्यक्ति की जांच करने वाले अध्ययनों के लिए प्रयोगात्मक नियंत्रण के रूप में उपयोग करें।
कमरे के तापमान का जोखिम कम से कम करें। जमे हुए भंडारण से पैराफिन ब्लॉक को हटाने के बाद, जितनी जल्दी हो सके सेक्शनिंग के साथ आगे बढ़ें। शेष ब्लॉक को -25°C से -15°C भंडारण पर लौटा दें। संभावित एंटीजन हानि को कम करने के लिए सेक्शनिंग के तुरंत बाद
उचित आसंजन स्लाइड का प्रयोग करें. गर्मी-प्रेरित एंटीजन पुनर्प्राप्ति और बाद में आईएचसी प्रक्रियाओं के दौरान ऊतक अलगाव को कम करने के लिए सकारात्मक रूप से चार्ज या अन्य उपयुक्त चिपकने वाली स्लाइड की सिफारिश की जाती है।
केवल अनुसंधान उपयोग. यह उत्पाद केवल अनुसंधान उपयोग (आरयूओ) के लिए है और नैदानिक निदान के लिए नहीं है.
सीओए दस्तावेज़ीकरण। प्रदान किया जाता है। विश्लेषण प्रमाणपत्र (सीओए) प्रत्येक उत्पाद बैच के लिए उपयोगकर्ताओं को भविष्य में संदर्भ के लिए संबंधित सीओए को बनाए रखने की सलाह दी जाती है। बैच-विशिष्ट सीओए में उत्पाद रिलीज और गुणवत्ता मूल्यांकन के लिए उपयोग किए जाने वाले आईएचसी धुंधला परिणाम शामिल हैं।
